蛋白都有哪些分类？

什么是重组蛋白？

重组蛋白是一种通过基因工程技术生产的蛋白质，其DNA序列来自于不同来源的基因，通常是来自于不同的物种。重组蛋白可以通过转化宿主细胞表达、纯化和结晶等步骤得到。

重组蛋白的应用范围非常广泛，包括制造药物、研究生命科学、生物技术等领域。比如，人类胰岛素、生长激素和白细胞介素等药物就是通过重组DNA技术制备的。此外，重组蛋白还广泛应用于疫苗制造、酶工业和基因治疗等领域。

重组蛋白的获得途径？

重组蛋白的制备需要通过基因克隆、转染、表达和纯化等一系列复杂的过程。其中，基因克隆是指将目标基因的DNA序列克隆到表达载体中，转染是指将重组表达载体导入到宿主细胞中，表达是指利用宿主细胞的生物合成机制来合成目标蛋白，纯化是指通过一系列物理和化学分离技术将目标蛋白从复杂的宿主细胞中纯化出来。

重组蛋白需要使用表达系统来对其进行制备，其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。

体外重组蛋白的生产主要包括四大系统：原核（常用大肠杆菌）、真核（常用酵母）、哺乳动物细胞（常用CHO、HEK293）及昆虫细胞蛋白体系。合适表达系统的选择取决于重组蛋白的特性、重组蛋白的预期应用以及该系统能否生产足够量的蛋白质，根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统，提高表达成功率。

重组蛋白的表达系统都有哪些

目前应用最广泛的表达系统有三大类，大肠杆菌（Esherichia coli或E.Coli）表达系统、酵母表达系统（Pichia Pastoris或P.Pastoris）、CHO细胞表达系统。其中，大肠杆菌是表达重组蛋白最常用的宿主菌，已应用于许多具有重要药用价值蛋白的生产。大肠杆菌表达系统具有许多优点，如生长快、培养成本低廉、遗传背景清楚和易实现高密度培养等。

不同的表达系统和培养方法显著影响下游的处理过程，目标蛋白表达是否形成包涵体，目标蛋白表达的定位（胞内、细胞膜内、周质空间和胞外），蛋白表达的量都依赖于所选择的的表达系统。

HEROSTEM LAB公司的蛋白主要为E.Coli、P.Pastoris以及HEK293体系表达。

医疗美容中的重组蛋白都有哪些？

• 玻尿酸（Hyaluronic Acid，简称HA）：是一种天然存在于人体组织中的重要成分，具有保水、滋润、填充等作用。通过基因工程技术，可以大规模生产高纯度的重组玻尿酸，广泛应用于医美领域中的注射填充和皮肤护理等方面。

• 胶原蛋白（Collagen）：是一种主要存在于人体结缔组织中的蛋白质，具有保持皮肤弹性、抗衰老、修复受损组织等作用。重组胶原蛋白可以通过基因工程技术制备得到，广泛应用于医美领域中的填充、修复和促进皮肤再生等方面。目前，可以重组的胶原蛋白包括I型、III型、IV型、VII型、XVII型等。（点击查看更多关于胶原蛋白的介绍）

• 神经毒素（Botulinum Toxin，简称BTX）：是一种由肉毒杆菌产生的神经毒素，可以抑制神经肌肉接头处的神经冲动传导，从而达到肌肉松弛和抗皱的作用。目前重组肉毒毒素已进入临床阶段，HEROSTEM LAB汇融实验室也成功开发出了小分子（肉毒素A）的重组肉毒毒素。

• 纤连蛋白（Fibronectin，简称FN）：是一种存在于人体内的重要结构蛋白，参与了许多细胞和基质的相互作用。重组纤维连接蛋白被广泛应用于医疗美容领域中的皮肤再生、创面愈合等方面，具有促进细胞增殖、加速伤口愈合等作用。

• FGF（Fibroblast Growth Factor，成纤维细胞生长因子）家族是一类重要的细胞生长因子，重组的FGF（rhFGF）在医疗美容领域中有广泛的应用。rhFGF主要应用于促进皮肤细胞的生长和再生，达到抗衰老、修复和美容的目的，已成功被开发成为加速伤口愈合的药物。

无动物成分是什么意思

HEROSTEM LAB公司的重组蛋白均为无动物成分（Animal-Free）。Animal-Free是指在独立的、无动物成分的生产车间中生产出来的，其生产过程中未使用任何动物来源的材料（例如胰蛋白胨等任何含动物成分的培养基或试剂），因此可保证最终的重组蛋白中不含任何动物成分，非常适合于临床前试验和动物研究。

重组蛋白通常是用细菌表达，而细菌培养基中需要添加胰蛋白胨（Trypton）等动物来源的组分，这些组分不可避免地导致不明的动物成分在终端产品中残留。虽然终端产品纯度可达98%或99%以上，其残留的杂质很可能就包含胰蛋白胨的动物成分。这些含量极微的成分会导致其中所含动物病原体（如疯牛病病毒及其它未知病原体）传染给人和动物。另外，这些动物成分中的异源蛋白也会引起人和动物的异体排斥或过敏反应。因此，当重组蛋白在应用过程中可能接触到人体或动物体时（如细胞治疗和动物体内实验等），请尽量选用Animal-Free的重组蛋白。

什么是"蛋白标签"？

蛋白标签（Tag）指重组蛋白制备过程中与目的蛋白融合表达的蛋白或多肽。HEROSTEM LAB的重组蛋白产品（包括重组胶原蛋白）大部分为Tag-Free，但少数重组蛋白产品因为不同目的需要加特定标签。

• 标签利于蛋白纯化；

• 当目的蛋白无特定抗体直接鉴定，可利用标签进行Western Blot或ELISA分析方法鉴定；

• Fc标签可以提升重组蛋白的半衰期以提高分子的稳定性，同时也能够促进重组蛋白形成活性二聚体。

重组蛋白标签对蛋白的生物学活性影响存在未知结论，但对大部分检测应用中，重组蛋白的标签对蛋白本身生物学活性并无影响，所以无需移除。我们对重组蛋白产品都已经做过生物学活性检测并将数据公示于CoA中。

重组胶原蛋白的禁忌症？

HEROSTEM LAB的重组胶原蛋白大部分为III型人源化胶原蛋白、经过改构后的融合蛋白（例如COL3FN胶原，货号：GB08，酵母表达），以及其他型的胶原蛋白（例如IV型胶原蛋白，货号：GB14，真核表达）。这些重组胶原蛋白虽然皆来自于人类基因，但并非代表人体对其不产生免疫反应。因此，在使用重组胶原蛋白之前，要确保使用者对这类蛋白不产生或者产生较低的应激反应。以下人群应避免使用重组胶原蛋白：

• 有严重过敏或自体免疫病史患者；

• 对胶原蛋白过敏患者，包括（但不限于）曾使用胶原蛋白制品，如胶原注射剂、植入剂、止血棉、缝合线、生物胶等而产生明显过敏现象者；

• 存在感染性、化脓性伤口或开放性创面者；

• 严重疤痕体质者、凝血功能障碍或正在使用抗凝药物者（如阿司匹林或非类固醇抗炎药物等）、白癜风患者禁用；

• 患有严重糖尿病、严重系统性疾病、器质性病变者或目前系统性疾病用药者；

• 皮炎、皮肤过敏期、皮肤病毒感染者、对本治疗方法不能耐受者慎用；

• 特别注意：女性避开怀孕期、哺乳期，月经期；

• 经常暴露于紫外线之下的人群；

• 30日内接受过面部治疗者或者皮肤护理者，需谨遵医嘱；

• 新冠阳性或新冠康复30日内的康复者。

重组胶原蛋白的检测是什么？

1. 基因序列：经N端序列分析。必要时，使用SDS-PAGE，HPLC和质谱分析等方法与标准品进行比对；

2. 蛋白纯度：

   2.1 经SDS-PAGE

   2.2 HPLC分析

3. 生物活性：经相关的体外或体内生物活性检测，详见下文；

4. 蛋白含量：

   4.1 紫外分光光度

   4.2 BCA蛋白定量测定

   4.3 SDS-PAGE分析

   4.4 HPLC法与标准品比对

5. 内毒素含量：经动态LAL（西方鲎试剂）法或TAL（东方鲎试剂）法测定；

6. 无菌：所有蛋白溶液在分装冻干前经0.22um滤膜过滤除菌，在B+A级环境分装、冻干及封盖；

7. 分子量：SDS-PAGE分析；

8. 宿主蛋白残留：荧光染色；

9. 宿主DNA残留：ELISA试剂盒；

10. 支原体检测：支原体试剂盒。

重组蛋白的生物活性是什么？

蛋白质的生物活性是各种蛋白质功能的体现。或者您可以理解只有蛋白质有活性的概念，它才能执行它的功能。具有生物活性的蛋白质称为活性蛋白质，即具有生物活性的活性蛋白质。从理论上讲，天然蛋白都是活性蛋白，而重组蛋白并不总是活性蛋白，因为重组蛋白的产生是一个复杂的过程，其中许多因素对其生物活性至关重要，例如理想的表达系统、合适的表达载体、纯化等。

1. ED₅₀的计算：

HEROSTEM LAB的蛋白产品ED₅₀（即半数有效浓度，其定义是对特定细胞引起50%最大反应的蛋白浓度，单位为ng/mL）可在蛋白产品COA中获取，这种活性表示法仅适用于剂量反应曲线呈S形的细胞因子。将1 ng/mL ED₅₀定义为1 unit，则产品生物学活性Specific Activity的换算公式如下：

Specific Activity_{（units/mg）} = 1 × 10 ⁶  ÷  ED_{50（ng/mL）}

以上计算公式并不适用于International Units（IU）和ED₅₀的换算关系，我们建议采用国际标准品对比相同实验获得该蛋白的IU值。

2. 影响ED₅₀的因素：

产品说明书中的实验方案只是确认该产品的ED₅₀，如果客户的实验类型与我们相同，则可以按照产品标定的生物活性进行实验；若实验采用了不同的细胞种类或方法，我们建议客户按照梯度浓度通过实验获得最佳ED₅₀值，并依据此数值制定相应的实验方案以及产品的添加量。如对生物活性或实验方法有疑问，可联系我们的技术支持（Support@herostem.com.cn）。

重组胶原蛋白的注意事项？

• 轻微红疹红肿淤青属于正常现象，一般会在术后2-3天内消失；

• 面部使用后12小时不沾水，必要时请用生理盐水擦拭；

• 使用后一周内『三防一禁』：防尘，防晒，防刺激，禁止使用功能性护肤品；

• 饮食清淡，避免食用海鲜、辛辣刺激性食物；

• 疗程期间禁止饮酒；

• 使用后一周早晚使用无菌类修复类产品，加强补水和防晒措施；

• 如果与其他产品复配共用，则须确保复配的产品完全无菌，没有蛋白酶的残留，因为蛋白酶会切断胶原蛋白；

• 由于利多卡因可能会与蛋白或糖结合而改变蛋白的特性，禁止重组胶原蛋白与利多卡因复配。

什么是蛋白质的变性？

在一些理化因素的作用下，蛋白质的特定空间结构被破坏，导致其原有理化性质的改变和生物活性的丧失。这种现象称为蛋白质变性，这些蛋白质被称为变性蛋白质或非活性蛋白质。

蛋白质变性过程通常是不可逆的。变性蛋白质通常是固体，不溶于水和其他溶剂。它们也失去了原始蛋白质的特性。换句话说，变性蛋白质不具有生物活性，不再执行特定的生物学功能。对于酶来说，它会失去催化能力。变性的主要原因是热、紫外线、剧烈搅拌、强酸和碱。

重组蛋白的共线生产如何解决？

我们设立了严格的质量体系，按照国家药品监督管理局发布的《药品共线生产质量风险管理指南》规范管理产品的生产，最大程度降低甚至杜绝共线生产导致的产品间的污染、交叉污染，保证产品的安全、有效和质量可控，确保客户安全地使用我们的产品。

重组蛋白的运输及储存方式？

1. 储存：

   1.1 重组胶原蛋白制剂常温下较为稳定，可在室温下存储超过2年；

   1.2 一旦产品开盖，则须在1小时内使用；

   1.3 如果与其他产品复配，则须确保复配的产品完全无菌，没有蛋白酶的残留，因为蛋白酶会切断胶原蛋白。

2. 运输：

   一般采用蓝冰或者室温运输。个别产品会使用干冰运输，例如重组全能核酸酶、胰蛋白酶等。

其他问题

您对HEROSTEM LAB公司的产品有任何问题，请随时联系我们的销售部门（client@herostem.com.cn或4009-204-254）。